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產品簡介:
血清中的無機磷(lnorganic phosphorous)主要由 H2PO 和HPO: 兩種磷酸根陰離子組成,上述陰離子在在不同的 pH 環境下能快速相互轉換,在 pH7.4 血清中兩種磷酸根陰離子濃度比例為 1:4;在酸中毒環境下二者濃度約為 1:1;在堿中毒環境下二者濃度比例為1:9;在 pH4.5 尿液中濃度比例為 100:1。WHO 推薦的常規檢測方法為比色法,我國衛生部臨檢中心推薦的常規方法為硫-酸-亞-鐵鉬藍比色法和米吐爾鉬藍比色法,亦可采用紫外分光光度法。無機磷檢測試劑盒(紫外比色法)無需處理樣本,利用無機磷與鉬酸銨結合生成磷鉬酸銨,通過紫外分光光度計檢測 325~340nm 處吸光度,根據公式計算出無機磷含量該紫外法優點在于:操作簡單、快速、穩定;缺點在于:易受溶血、黃疽、脂血的干擾。該試劑盒僅用于科研領域,不宜用于臨床診斷或其他用途。
操作步驟(僅供參考):
(選做)制備樣品:
1、①血漿、血清樣品:血漿、血清按照常規方法制備,可以直接用于本試劑盒的測定,-20℃凍存,用于 Pi的檢測。
②細胞或組織樣品:取恰當細胞或組織進行勻漿,低速離心取上清,-20℃凍存,用于Pi 的檢測。
③高濃度樣品:如果樣品中含有較高濃度的 Pi,可以使用 ddH,0 稀釋,不宜使用普通蒸餾水稀釋。
④(選做)樣品準備完畢后可以用 BCA 蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度,以便于后續計算單位蛋白重量組織或細胞內的 Pi 含量。
2、制備磷標準工作液:取適量的磷標準(1mg/ml),按磷標準(1mg/ml):磷標準稀釋液=1:39 的比例稀釋,即獲得磷標準工作液(25 μg/ml=0.807 mmol/L),4℃保存,用于 Pi的檢測。
3、制備鉬酸銨顯色液:稱取適量的鉬酸銨粉末,按照鉬酸銨粉末:鉬酸銨稀釋液(2x):去離子水=12mg:10m1:10ml的比例混合溶解,即可使用。亦可稱取 120mg 鉬酸銨粉末加入 100ml去離子水,充分溶解后分裝成 10ml或適當規格的小份,使用時與鉬酸銨稀釋液(2x)等比例混合即可使用,-20℃保存,可適當延長保質期。鉬酸銨顯色液配制后可 4℃保存2周,如溶液變渾濁或顏色加深則應棄用。請注意,本產品提供多于實際用量的鉬酸銨粉末。
4、Pi 加樣:按照下表設置空白管、標準管、測定管,溶液應按照順序依次加入,并注意避免產生氣泡,小心混勻。如果樣品中的無機磷濃度過高,可以減少樣品用量或適當稀釋后再進行測定,樣品的檢測最好能設置2平行管,求平均值。
5、Pi 檢測:混勻,室溫靜置 5min,比色杯光徑 1cm,分光光度計 340nm 處檢測,以空白管調零,讀取標準管、測定管的吸光度(即為 A標準,A測定)。
有效期: 12 個月有效。常溫運輸,按要求保存。
南京億迅生物科技有限公司出品的各類生化試劑盒,產品質量穩定,價格實惠,在國內各科研院所和高校擁有良好的品譽。
該類產品有:花青素(Anthocyan)檢測試劑盒,細胞鐵離子檢測試劑盒,尿酸(UA)檢測試劑盒,D-木糖檢測試劑盒等。歡迎各界用戶來電或留言垂詢,無論您是親自下單,還是咨詢技術問題,我們將為您真誠服務。
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