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二抗還必須對應一抗的類和亞類。尤其是一抗是均質的單克隆抗體時，這點 特別重要。例如，一些一抗分離類型是小鼠IgM，而有一些是IgG。IgM通常占血清免疫球蛋白的10%。IgM抗體在大多數抗原的早期免疫反應中起著重要的作用，由于其體積較大，很大程度上局限于血漿中。 Alexa Fluor 647標記的兔抗雞IgM

常用的小分子抗體有單鏈抗體、單域結構、雙特異性抗體、免疫粘連素、催化抗體等。生物素是一種水溶性維生素，一般歸類為B復合維生素，又稱維生素B4。 Cy5.5標記的兔抗雞IgG

購買二抗時注意分別選擇抗小鼠IgM和小鼠IgG的抗體。 小鼠IgG抗體還可以分為各種亞類，如IgG1，IgG2a，IgG2b，IgG2c，IgG3。 PE-Cy5.5標記的兔抗雞IgM

雖然可購買能識別所有亞類的一般的抗小鼠IgG二抗，但盡可能購買抗某一特定亞類的抗體以增加特異性。大多數物種的分離類型都是IgG，物種特異性抗IgG抗體能很好地工作。但注意鳥類或禽類的免疫球蛋白為IgY。 PE-Cy7標記的兔抗雞IgM

二抗必須能識別一抗。如果一抗是小鼠單克隆抗體，分離類型是小鼠IgG1，那么二抗必須選擇抗小鼠IgG的抗體；同樣，如果一抗來源于山羊，二抗必須選擇抗山羊的抗體。 Alexa Fluor 647標記的兔抗雞IgG

抗體是機體在抗原刺激下所產生的特異性球蛋白，又稱為免疫球蛋白。20世紀50年代末期，電鏡結果結合poler 和nisonoff 研究結果，建立了經典的免疫球蛋白單體的Y 結構模式，天然的抗體分子由4條他肽鏈組成對稱結構，包括兩條相同的重鏈和兩條相同的輕鏈。 Alexa Fluor 555標記的兔抗豬IgG