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測試大腸桿菌的方法

更新時間:2021-02-03      瀏覽次數:5955

測試大腸桿菌的方法

一、檢測方法特點:與國標法中的九管法相對應,將原來幾步的試驗簡化為一步,時間由78h縮短為24h以內,省去了制備培養基、消毒和培養器皿的清洗處理等大量輔助性工作,隨時可以打開包裝進行抽樣檢測。注意事項:如果樣品的酸堿度在pH7以下,應先用滅菌1mol/L氫氧化鈉(NaOH)調節溶液調至中性,避免因pH的原因導致的紙片變黃而影響結果觀察。



二、快速檢驗方法的原理:將乳糖、顯色劑和選擇性培養基加載在紙片上,經培養后能夠在紙片上生長并發酵乳糖產酸的即為大腸菌群陽性,記錄每個稀釋度大腸菌群陽性紙片數,根據大腸菌群MPN表查出相應的大腸菌群數。

三、快速檢驗操作方法:

方法(1)1樣品處理:無菌稱取樣品25g(或25mL)放入含有225mL滅菌生理鹽水的采樣瓶或均質杯中,經充分振搖做成1:10的樣品勻液,用1mL滅菌吸管吸取1:10樣品勻液,注入含有9mL滅菌生理鹽水的試管內,振搖試管制成1:100的稀釋液。以此類推,每個稀釋度更換一支滅菌吸管。2接種:選取兩個稀釋度進行接種,普通食品一般采用1:10和1:100這兩個稀釋度,飲料和飲用水采用原液和1:10兩個稀釋度。每份由三片大紙片(接10mL),六片小紙片(接1mL)組成,大片每小袋二張疊放算作一片。用滅菌吸管吸取10 mL 1:10稀釋液加到含有大紙片的塑料袋中(相當于接樣品1g),吸透后平放,做三個重復。再用1mL滅菌吸管吸取1 mL同一稀釋液涂布到含有小紙片的塑料袋中(相當于接樣品0.1g),做三個重復。再取一支1 mL滅菌吸管吸取1 mL 1:100稀釋液涂布到含有小紙片的塑料袋中(相當于接樣品0.01g),做三個重復。3 培養:將接種好的紙片(可疊放)放入37°C培養箱中培養15h~24h。

方法(2) 1取樣接種:用滅菌吸管吸取10mL水樣插入裝有大紙片的塑料薄膜袋中,均勻涂布,共做5個重復;分別取1mL水樣加到小紙片中,共接5個重復;另取1mL水樣加到9mL無菌水中混勻,用1mL滅菌吸管分別吸取1mL(即0.1mL水樣),加到zui后5片小紙片中。2培養:將接種好的紙片平放于培養箱中,37℃培養15h。3結果判斷:觀察每片顏色變化,若紙片保持紫藍色不變為大腸菌群陰性,紙片變黃或在黃色背景上呈現紅色斑點或片狀紅暈為陽性。4報告結果:根據每個稀釋度的陽性反應紙片數,查MPN表可得出水樣中大腸桿菌的MPN值。

四、數據結果判斷與計數分析:若紙片變黃或在黃色背景上呈現紅色斑點為大腸菌群陽性紙片。紙片保持紫蘭色不變或在紫蘭色背景上呈現紅色斑點,但周圍沒有黃色均為大腸菌群陰性紙片。記錄每個稀釋度大腸菌群陽性紙片數,根據大腸菌群MPN表查出相應的大腸菌群數。如接種的第-一個稀釋度的稀釋液為原液,應將表上查出的結果除以10,以此類推。

五、食品大腸桿菌檢驗適用范圍:適用于各類食品、飲用水、原料和純凈水等樣品中大腸菌群的快速測定和快速計數。

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